Judith décapitant Holopherne est une peinture à l'huile sur panneau de bois, réalisée par la femme peintre italienne Artemisia Gentileschi (1593 – 1653).
Artemisia est une représentante du caravagisme et qui a travaillé en Italie et en Angleterre.
L’épisode, peint par l'artiste et très fréquent dans la tradition artistique, est tiré de la Bible. Judith, assistée de sa servante, tue le général Holopherne endormi, après l'avoir séduit.
Le tableau représente d'une manière violente et réaliste, le moment du meurtre d'Holopherne. Les deux femmes appartiennent à des classes sociales différentes, comme on peut bien voir de leurs attitudes. Judith, le regard troublé, tranche la tête de l'homme, en s'éloignant de son corps pour ne pas se tacher du sang du général, tandis que la servante affiche une expression calme. Les deux femmes collaborent pour accabler Holopherne.
L’interprétation traditionelle du tableau reconnaît en cette violence le désir de vengeance et de justice de Artemisia à l'égard de l'homme qui avait commis violence sexuelle sur elle. L'artiste avait été violée; son agresseur eut un procès qui se termina par une condamnation très légère de l'homme. Le courage que Artemisia montra dans son témoignage public en a fait un symbole du féminisme du XXesiècle.
Une autre version du tableau est gardée à Naples.