Matteo di Giovanni en algunos casos fue conocido como Matteo da Siena, debido a su proximidad a la escuela de pintura de Siena. En el siglo XIV los sieneses alcanzaron un nivel de calidad artística a rivalizar con los maestros florentinos. La primera obra importante conocida de Matteo es representada por la decoración de la Capilla de San Bernardino de Siena, en 1457, aunque se sabe que en 1452 trabajó en la catedral de Siena. Su primera formación e influencia procedieron de Giovanni di Pietro, un hermano del Vecchietta: ambos hermanos se formaron en Sassetta (1392-1450), pintor de Siena. Él fue influenciado también por los primeros pintores de Umbría (Kren y Marx, Galería Web de Arte).
Sus obras a veces se comparan con las de los hermanos Pollaiuolo, Antonio (1432-1498) y Piero (1441-1496), activos en Florencia. Sin embargo, la obra de Matteo, como era típico de la escuela de Siena, era conforme con el misticismo, en contraste con el naturalismo florentino de la época. Entre sus obras más conocidas, La masacre de los inocentes, la Virgen con el Niño y ángeles, san Jerónimo y san Bartolomé desollado. En lo Uffizi está expuesta su Virgen con el Niño y cuatro ángeles, que muestra la influencia que tuvieron sobre Matteo los primeros artistas Mateo sieneses, como Duccio (1255-1318) y su larga línea de herencia.