La llegada del Manierismo comenzó hacia el final de la carrera de Leonardo da Vinci y Rafael, alrededor de 1520, alcanzando la plena expresión en el genio italiano de un artista del siglo XVI como Miguel Ángel (1475-1564). La Última Cena de Leonardo y La Escuela de Atenas de Rafael son los dos mejores ejemplos del equilibrio entre la tradición del Alto Renacimiento y el Manierismo. Alrededor de 1525, el arte italiano atravesaba ese período llamado Alto Renacimiento, que alcanza el punto más alto con la obra de Leonardo, junto al arte de Giorgione (1477-1510) y el posterior maestro veneciano, Tiziano (1485-1576). También los últimos trabajos de Andrea del Sarto (1486-1531) y Correggio (1489-1534), comienzan a definir la aparición del Manierismo.
Si el Renacimiento italiano tuvo como centro Florencia y sus maestros, el Manierismo nació principalmente en Roma. Aquí la pintura, la arquitectura y la escultura hicieron experiencia de las cumbres alcanzadas por el Renacimiento y los artistas comenzaron a experimentar las formas más expresivas del Manierismo, para volver al naturalismo durante el Barroco. La carrera de Giulio Romano (1499-1546) encarna el Manierismo en la pintura y la arquitectura, desarrollando un distinguido estilo romano, después de haber estudiado el maestro maestro Rafael. La expansión del Manierismo en Florencia se puede ver en las obras de Agnolo Bronzino, el Bronzino (1503-1572), mientras que Tintoretto (1518-1594) caracterizó el arte del siglo XVI de estilo veneciano.
Otros importantes pintores del siglo XVI son el Sodoma (1477-1549), el Garofalo (1481-1559), Pontormo (1491-1557), el Rosso (1494-1540), Parmigianino (1503-1540), Alessandro Allori (1535-1607), Jacopo da Empoli (1551-1640), Scarsellino (1550-1620), entre otros.
Probablemente el artista más importante del siglo XVI, por su contribución a la pintura y la arquitectura, sino también por sus biografías, fue Giorgio Vasari (1511-1574). Con su obra dedicada a las biografías de artistas, Las vidas de los más excelentes pintores, escultores y arquitectos, publicada por primera vez en 1550, reforzó el impacto del arte italiano entre los siglos XIV y XV, y hacia el siglo XVI.